双受精是被子植物的主要特征之一，花粉管导向（pollen tube guidance）调控了花粉管在雌蕊中的快速生长和及时靶向胚珠的过程，是雌雄配子体双方进行信号交流和互动的重要生理活动。花粉管导向过程成功的关键是雄配子花粉管感知和响应雌配子分泌的吸引信号。拟南芥花粉特异性受体激酶（PRK）家族部分成员在此过程中发挥着关键作用，其中在花粉管顶端极性分布的PRK6 和 PRK3对于感知雌配子体分泌的吸引小肽LURE、花粉管生长和导向至关重要，但有关调控和维持PRK6和PRK3极性定位的分子机制仍不清楚。

2022年7月21日，yh0612cc银河向云课题组在植物学主流期刊The Plant Cell发表了题为The Phospholipid Flippase ALA3 Regulates Pollen Tube Growth and Guidance in Arabidopsis 的研究论文，发现了拟南芥P4型ATP酶家族成员ALA3通过影响负电荷磷脂介导的PRKs在花粉管顶端的极性分布调控花粉管生长和导向。

向云课题组之前发现ALA3参与建立和维持磷酯酰丝氨酸（PS）在花粉管中的极性定位，并且参与调控PS介导的囊泡运输过程（Zhou et al., 2020, The Plant Cell）。在本论文中，该课题组进一步发现ALA3功能缺失导致种子败育、花粉管生长缓慢、胚珠靶向异常、花粉管生长对外源的雌配子体吸引小肽AtLURE1.2不敏感等有性生殖过程发生异常的表型。

图1、ala3突变体表现出花粉管生长、导向和种子败育的表型。

该课题组发现ALA3 功能缺失影响了拟南芥PRKs家族多个成员的定位模式，尤其导致PRK6 和PRK3在花粉管顶端的极性定位模式发生显著改变。 此外，还发现PRKs家族成员在胞外近膜区含有1-2个的正电荷氨基酸富集区，大多PRKs成员可以直接结合磷酯酰丝氨酸（PS）等负电荷磷脂。但突变结合负电荷磷脂功能的PRK38Q/9Q和PRK66Q/8Q丧失了顶端极性定位，并且不能回补突变体的表型，表明结合PS等负电荷磷脂对于PRK3/6的极性定位和生理功能不可或缺。序列分析表明，至少93 个拟南芥LRR-RLK含有此正电荷氨基酸富集区。​

图2、PRK3/6及突变形式的PRK3/6结合磷脂和花粉管定位的结果。

因此，本项工作发现了ALA3参与建立和维持磷酯酰丝氨酸（PS）在花粉管顶端的极性分布，PS一方面通过影响花粉管顶端分泌囊泡介导的极性运输，间接影响了 PRK3和PRK6 在花粉管顶端的分布；另一方面，PS 也可能通过直接结合的方式将PRK3和PRK6招募到花粉管顶端，从而共同维持PRK3和PRK6 在花粉管顶端的极性定位。这些结果为揭示花粉管导向、PRKs和其它RLKs的极性定位、ALAs和负电荷磷脂的生物学功能等重要科学问题的分子机理研究提供了新的理论依据和思路。

yh0612cc银河的杨洋博士和牛月副教授为共同第一作者，向云教授为通讯作者。向云教授课题组的研究生陈涛、张宏凯、张晶霞、毕萌萌和范悦敏参与了相关的实验工作，青年研究员钱东和安黎哲教授参与了本论文的设计。该研究得到了国家自然科学基金委面上项目以及兰州大学中央高校经费的资助。

论文链接：https://doi.org/10.1093/plcell/koac208

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